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LYMPHOCYTE SEPARATION MEDIUM LSM淋巴細(xì)胞分離液

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LSM淋巴細(xì)胞分離液,從去纖維蛋白或肝素化的全血中分離淋巴細(xì)胞,用于體外分離外周血淋巴細(xì)胞,也可以從其他來源中分離單核細(xì)胞,包括臍帶血細(xì)胞和骨髓細(xì)胞。

產(chǎn)品特點(diǎn):

MP Biomedicals對(duì)Boyum的提取配方進(jìn)行了改良,在淋巴細(xì)胞分離液LSM中成功地運(yùn)用sodium diatrizoate替代了sodium metrizoate。LSM(sterile-filtered) 溶液密度1.077-1.080g/ml(20℃) 。僅需一步離心操作便能高效地回收淋巴細(xì)胞。

工作原理:

  去纖維蛋白或肝素化人血以1:1的比例用生理鹽水或*稀釋,在分離溶液中分層,低速離心30min。離心過程中,由于差速遷移終形成不同的細(xì)胞層。聚集在管底的顆粒主要是紅細(xì)胞和多形核粒細(xì)胞,它們通過梯度遷移至管底。由于其密度不同,淋巴細(xì)胞和其他單個(gè)核細(xì)胞(單核細(xì)胞和血小板)分布在血漿和LSM兩層之間。淋巴細(xì)胞可以通過吸取分界層溶液回收,后進(jìn)一步清洗去除血小板,LSM和血漿。

使用方法:

  1. 輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合

  2. 無菌轉(zhuǎn)移3 ml LSM到15 ml離心管中。

  3. 混合2 ml去纖維蛋白血液或肝素化血液和2 ml 生理鹽水

  4. 仔細(xì)的將稀釋血液加入含有3 ml LSM(室溫)的15ml離心管中,在血液和LSM中形成一個(gè)明顯的分層。不要將稀釋血液混合入LSM中。

  5. 室溫下400xg離心15-30min,離心可以沉淀紅細(xì)胞和多形核白細(xì)胞,同時(shí)可以在LSM上形成一層單核淋巴細(xì)胞,如上圖所示(具體分層情況為血漿層-單個(gè)核細(xì)胞層-LSM層-RBC顆粒)。

  6. 吸出淋巴細(xì)胞上方2-3mm的血漿。

  7. 吸取淋巴細(xì)胞層以及它下面一半的LSM,并轉(zhuǎn)移到另外一個(gè)離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至離心管內(nèi)的淋巴細(xì)胞層中,室溫(18-25°C)離心10分鐘,離心速度設(shè)定在既不損傷細(xì)胞又能沉淀細(xì)胞即刻,例如160 – 260 xg(清洗去除LSM,并降低血小板的百分比)。

  8. 再用平衡鹽緩沖液清洗細(xì)胞,后用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基重懸細(xì)胞。

規(guī)格參數(shù):

貨號(hào)英文名中文名規(guī)格
0850494XLYMPHOCYTE SEPARATION MEDIUMLSM 淋巴細(xì)胞分離液100ML
0850494LYMPHOCYTE SEPARATION MEDIUMLSM 淋巴細(xì)胞分離液100ML*5

 

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