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古朵生物:彈性蛋白酶檢測(cè)方法

時(shí)間：2020/1/2閱讀：797
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　　彈性蛋白酶，是由動(dòng)物的胰臟用水提取而成，也可用細(xì)菌的培養(yǎng)液在低溫下用水提取獲得。
 
　　*是由240個(gè)氨基酸組成的多肽，其CAS:39445-21-1，分子從鏈走向和空間構(gòu)造型與*相似。*是有*的蛋白酶，它存在于所有動(dòng)物的胰臟中。在人的動(dòng)脈、皮膚、血小板和白血球中也存在*活力的物質(zhì)。除此之外，一些微生物和植物中也具有*活力物質(zhì)。
 
　　彈性蛋白是一種單純蛋白、它不含輔助基和金屬離子，其活性中心取決于特異的三維結(jié)構(gòu)，當(dāng)其中發(fā)生兵役，構(gòu)型將會(huì)改變、引起失活。
 
　　彈性蛋白酶制備提?。?br /> 
　　一般由動(dòng)物的胰臟用水提取而得，也可用細(xì)菌的培養(yǎng)液在低溫下用水提取而得。
 
　　彈性蛋白酶檢測(cè)步驟：(僅供參考)
 
　　(1)準(zhǔn)備適當(dāng)數(shù)量的包被微孔。標(biāo)準(zhǔn)品、稀釋標(biāo)本加樣量均為100μl/孔。五個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為3000、1500、750、375 和0ng/ml(以標(biāo)本稀釋液作為0 標(biāo)準(zhǔn))。
 
　　(2)用封片膜封板。以孵育振蕩器(350 ～400rpm)室溫(18 ～28℃)反應(yīng)60min。
 
　　(3)棄去封板膜。洗板： 以洗滌液注滿微孔,每次浸泡1min,共洗板5 次。
 
　　(4)每孔加酶結(jié)合物100μl。用封板膜封板。以孵育振蕩器( 350 ～400rpm) 室溫(18 ～28℃)反應(yīng)45min。
 
　　(5)棄去封板膜。洗板：以洗滌液注滿微孔，每次浸泡1min, 共洗板5 次。
 
　　(6)每孔加顯色液100μl, 室溫避光反應(yīng)20min[顯色液臨用前配制。方法是：顯色劑A: 顯色劑B按體積比40: 1混合( 如顯色劑A 400μl + 顯色劑B 10μl),顯色液配制后30min 內(nèi)使用。
 
　　(7) 每孔加終止液100μl,充分混勻。15min 內(nèi)上酶標(biāo)儀雙波長(zhǎng)450/630nm 比色。

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